วิธีสังเคราะห์ Tirzepatide: กลไก Fmoc SPPS อธิบายทีละขั้นตอน (คู่มือ 2026)

การสังเคราะห์เพปไทด์เฟสแข็ง (SPPS) เป็นเทคโนโลยีการผลิตทางอุตสาหกรรมที่โดดเด่นสำหรับเปปไทด์เพื่อการรักษาโรค และเป็นช่องทางเดียวที่เป็นไปได้ในเชิงพาณิชย์สำหรับเปปไทด์สายโซ่ยาว-ที่มีกรดอะมิโน 30+

หลักการสำคัญของ SPPS ที่ได้รับการจัดตั้งขึ้นเป็นครั้งแรกเป็นวิธีการผลิตที่สามารถปรับขนาดได้คือการยึดกรดอะมิโนที่ปลาย C- ของเปปไทด์เป้าหมายเข้ากับพอลิเมอร์เรซินที่รองรับที่ไม่ละลายน้ำ จากนั้นจึงขยายสายโซ่เพปไทด์ทีละหนึ่งเรซิดิวจากปลาย C - ไปยังปลาย N - เคมีของเรซินในเฟสของแข็งเป็นตัวกำหนดว่าเมทริกซ์ของเรซินยังคงไม่ละลายตลอดทุกขั้นตอนของปฏิกิริยา ดังนั้นรีเอเจนต์ส่วนเกิน ผลพลอยได้ และโมเลกุลที่ไม่ทำปฏิกิริยาจะถูกกำจัดออกโดยการล้างด้วยตัวทำละลายแบบง่ายๆ - ซึ่งช่วยลดความจำเป็นในการทำให้บริสุทธิ์ขั้นกลางของชิ้นส่วนเปปไทด์แต่ละชิ้น ซึ่งเป็นคอขวดหลักของการสังเคราะห์เฟสของเหลวแบบดั้งเดิม-

กลยุทธ์การป้องกัน Fmoc เป็นมาตรฐานสากลสำหรับ SPPS อุตสาหกรรมสมัยใหม่ กลไกการลดการป้องกัน Fmoc อาศัย-การแตกตัวเร่งปฏิกิริยาของพันธะคาร์บาเมต โดยใช้สารละลายพิเพอริดีนอ่อนที่รักษากลุ่ม-การป้องกันโซ่ด้านข้างไว้ ขณะเดียวกันก็เปิดเผยเอมีนที่ปลาย N- สำหรับการควบคู่ในภายหลัง สภาวะของปฏิกิริยาที่ไม่รุนแรงนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งในการลดปฏิกิริยาข้างเคียงในการสังเคราะห์ลำดับยาว-

สำหรับการผลิตเปปไทด์เพื่อการรักษาโรคในระดับอุตสาหกรรม- SPPS มอบข้อได้เปรียบที่ไม่อาจทดแทนได้สามประการ:

• ระบบอัตโนมัติที่ปรับขนาดได้: วงจรปฏิกิริยาที่เป็นมาตรฐานเข้ากันได้กับ-เครื่องสังเคราะห์อัตโนมัติขนาดใหญ่ ซึ่งช่วยให้สามารถ-}ส่งออกแบทช์เป็น-ได้อย่างสม่ำเสมอตั้งแต่ระดับกรัมถึงกิโลกรัม
• ลดปฏิกิริยาข้างเคียง: การยึดเฟสของแข็ง-แบบขั้นตอนจะช่วยลดปฏิกิริยาข้ามระหว่างโมเลกุล-และการแตกของสายโซ่ ทั้งสองข้อบกพร่องที่แพร่หลายในการสังเคราะห์เปปไทด์-เฟสยาว-ของของเหลว
• การแก้ไขเฉพาะไซต์ที่แม่นยำ-: หมู่ฟังก์ชัน เช่น สายโซ่กรดไขมันใน tirzepatide สามารถรวมกันได้ในตำแหน่งที่กำหนดโดยมีค่ารีจิโอซีเล็กติวิตี้สูง โดยไม่กระทบต่อกรดอะมิโนที่ตกค้างอื่นๆ

สำหรับเปปไทด์ที่ยาวกว่า 30 กรดอะมิโน -การสังเคราะห์เฟสของเหลวส่งผลให้ได้ผลผลิตโดยรวมเกือบ-เล็กน้อยและต้นทุนการทำให้บริสุทธิ์ที่ห้ามปราม ส่งผลให้ SPPS กลายเป็นมาตรฐานอุตสาหกรรมสำหรับการผลิตเปปไทด์เพื่อการรักษาโรคอย่างไม่มีปัญหาในปี 2569

เนื่องจากเปปไทด์เชิงเส้นที่เป็นกรด 39-อะมิโน-ที่มีการดัดแปลงสายโซ่-ด้านกรดไขมันจำเพาะ-ตำแหน่ง ไทร์เซปาไทด์จึงจัดอยู่ในประเภทเพปไทด์สายโซ่ยาว- โดยที่ SPPS ไม่ได้เป็นเพียงตัวเลือกที่ดีที่สุดเท่านั้น แต่ยังเป็นสิ่งจำเป็นทางเทคนิคอีกด้วย

ลักษณะโครงสร้างสามประการทำให้ SPPS จำเป็นสำหรับเชิงพาณิชย์tirzepatide APIการผลิต:

• 39-กระดูกสันหลังยาวของกรดอะมิโน: ลำดับสารตกค้าง-ความยาวเต็ม 39- ต้องใช้ขั้นตอนการสร้างพันธะเพปไทด์ 38 ขั้นตอนติดต่อกัน การสังเคราะห์เฟสของเหลวจะต้องมีการแยกและการทำให้บริสุทธิ์หลังจากทุกขั้นตอน นำไปสู่การสูญเสียผลผลิตสะสมมากกว่า 99% โดยไม่มีความเป็นไปได้ทางการค้า
• แนวโน้มการรวมตัวสูง: Tirzepatide มีโดเมนของกรดอะมิโนที่ไม่ชอบน้ำหลายโดเมน และสายด้านข้างที่เป็นลิพิดของมันจะช่วยเพิ่มความสามารถในการไม่ชอบน้ำของโมเลกุลอีกด้วย การรวมตัวของเปปไทด์ใน SPPS เป็นความท้าทาย-ที่ได้รับการบันทึกไว้อย่างดีสำหรับโมเลกุลนี้ ในระบบเฟสของเหลว- สายเปปไทด์ที่กำลังเติบโตจะรวมตัวกันและพับทบในระดับที่มากขึ้นกว่าเดิม ทำให้เกิดการแตกหักของสายโซ่อย่างรุนแรงและ-เกิดปฏิกิริยาข้างเคียงที่ไม่เป็นไปตามเป้าหมาย
• ข้อกำหนดการปรับเปลี่ยนสายโซ่ที่เข้มงวด-: มอยอิตีของกรดไขมันที่ขยายครึ่งชีวิต-การไหลเวียนของ tirzepatide จะต้องรวมกับไลซีนที่เหลือโดยเฉพาะ การสังเคราะห์เฟสโซลิด-ทำให้สามารถยกเลิกการป้องกันและแก้ไขแบบเลือกได้ที่ตำแหน่งที่แน่นอนนี้ โดยมีปฏิกิริยา-นอกเป้าหมายน้อยที่สุด
•  

​

การสังเคราะห์ไทร์เซปาไทด์ทางอุตสาหกรรมใช้กลยุทธ์การป้องกัน Fmoc (9-ฟลูออเรนิลเมทอกซีคาร์บอนิล) ซึ่งเป็นโปรโตคอล SPPS ที่ได้รับการตรวจสอบอย่างกว้างขวางที่สุดสำหรับเปปไทด์เพื่อการรักษาโรคเกรด GMP กระบวนการทั้งหมดเป็นไปตามวงจรปฏิกิริยาที่ทำซ้ำได้ซึ่งจะพัฒนาเคมีการยืดตัวของสายโซ่เปปไทด์ทีละตัว โดยมีการควบคุมพารามิเตอร์ที่เข้มงวดในทุกขั้นตอนเพื่อลดข้อผิดพลาดของลำดับให้เหลือน้อยที่สุด

ขั้นตอนที่ 1: การโหลดเรซิน

การสังเคราะห์เริ่มต้นโดยการยึดกรดอะมิโนที่ปลาย C- ที่มีการป้องกัน Fmoc ของ tirzepatide เข้ากับเรซินเฟสของแข็ง- (โดยทั่วไปคือเรซิน Rink Amide สำหรับการผลิตเปปไทด์ที่ยาว) ความหนาแน่นในการโหลดได้รับการปรับเทียบอย่างระมัดระวัง: การทดแทนที่สูงเกินไปจะเพิ่ม-การรวมกลุ่มของโซ่ในขั้นตอนการยืดออกในภายหลัง ในขณะที่การโหลดที่ต่ำเกินไปจะลดประสิทธิภาพเอาต์พุตแบบแบตช์

ขั้นตอนที่ 2: การปลดการป้องกัน Fmoc

หลังจากการใส่เรซินและการล้างตัวทำละลาย สารละลายพิเพอริดีน/DMF ถูกนำมาใช้เพื่อกำจัดกลุ่มป้องกัน Fmoc ของปลาย N- ออก เผยให้เห็นเอมีนปฐมภูมิอิสระที่พร้อมสำหรับปฏิกิริยาการควบคู่ครั้งต่อไป การกำจัดการป้องกัน Fmoc มาตรฐานใช้พิเพอริดีน 20% ใน DMF โดยมีเวลาตอบสนอง 5–10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง เวลาปฏิกิริยาและความเข้มข้นของรีเอเจนต์ได้รับการควบคุมอย่างเข้มงวดเพื่อหลีกเลี่ยงการแตกแยกก่อนเวลาอันควรของกลุ่มป้องกันสายโซ่ด้านข้าง- ซึ่งเป็นแหล่งที่มาของสิ่งเจือปนทั่วไปในการผลิต-เปปไทด์ที่ยาวนาน

ขั้นตอนที่ 3: การเชื่อมต่อกรดอะมิโน

กรดอะมิโนที่ได้รับการป้องกัน Fmoc- ถัดไปในลำดับไทร์เซปาไทด์ถูกกระตุ้นล่วงหน้า-ด้วยระบบรีเอเจนต์คู่ควบ (HBTU/HOBt ที่เป็นมาตรฐานจับคู่กับเบส เช่น DIPEA) และป้อนเข้าไปในเครื่องปฏิกรณ์ หมู่คาร์บอกซิลที่ถูกกระตุ้นจะสร้างพันธะเปปไทด์ที่เสถียรโดยมีเอมีนที่ปลาย N- อิสระบนส่วนรองรับเรซิน

สำหรับตำแหน่งกรดอะมิโนที่ไม่ชอบน้ำและแบบสเตอริไลด์ของไทร์เซพาไทด์ จำเป็นต้องมีพารามิเตอร์การกระตุ้นที่ปรับเปลี่ยนและระยะเวลาของปฏิกิริยาเพื่อรักษาประสิทธิภาพการแปลงสภาพที่สูง

ขั้นตอนที่ 4: วงจรการยืดตัวของโซ่

การปลดการป้องกัน → การล้าง → การควบคู่ → วงจรการซักจะทำซ้ำตามลำดับตามลำดับไทร์เซปาไทด์ โดยตกค้างด้วยเรซิดิว จนกระทั่งแกนหลักของกรดอะมิโน- 39- เต็มถูกประกอบเข้าด้วยกันอย่างสมบูรณ์ สายด้านข้างของกรดไขมันจำเพาะเฉพาะตำแหน่งถูกนำเข้าที่ตำแหน่งไลซีนที่กำหนดผ่านทางการเลือกการป้องกันและการควบคู่ ก่อนขั้นตอนการตัดแยกขั้นสุดท้าย

ขั้นตอนที่ 5: ความแตกแยกและการปล่อยเปปไทด์ที่หยาบกร้าน

เมื่อตรวจสอบการประกอบแบบเต็ม-แล้ว เปปไทด์ที่ประกอบแล้วจะถูกแยกออกจากเรซินโดยใช้ค็อกเทลกรดไตรฟลูออโรอะซิติก (TFA) ที่มีสารกำจัดอนุมูลอิสระ ค็อกเทลสำหรับรักษาร่องอกมาตรฐานสำหรับ tirzepatide คือ TFA/น้ำ/TIS ในอัตราส่วน 95:3:2 โดยมีเวลาตอบสนอง 2-3 ชั่วโมงเพื่อลดปฏิกิริยาข้างเคียงและรักษาโครงสร้างสายโซ่ฝั่งกรดไขมัน- ขั้นตอนนี้จะลบกลุ่มป้องกันโซ่ด้านข้าง-ที่เหลือทั้งหมดพร้อมกัน สารละลายสำหรับการตัดแยกจะถูกรวบรวม ทำให้เข้มข้น และตกตะกอนเพื่อให้ได้ผงไทร์เซปาไทด์ที่หยาบ จากนั้นจะเข้าสู่กระบวนการทำให้บริสุทธิ์เปปไทด์ที่หยาบหลายขั้นตอนผ่านการเตรียม RP-HPLC

แม้จะมีโปรโตคอลที่ได้รับการปรับปรุงให้เป็นมาตรฐาน แต่ผลผลิตการสังเคราะห์โดยรวมของ tirzepatide ยังต่ำกว่าของเปปไทด์ที่มีความยาวสั้นและปานกลาง- (กรดอะมิโน 10-20 ตัว) มาก กลไกหลักสามประการผลักดันการสูญเสียผลผลิตนี้ ซึ่งทั้งหมดจะรุนแรงยิ่งขึ้นแบบทวีคูณเมื่อความยาวของโซ่เพิ่มขึ้น

ลำดับการลบ

หากขั้นตอนการควบคู่เดี่ยวล้มเหลวในการบรรลุความสมบูรณ์ 100% หมู่เอมีนอิสระที่ไม่ถูกทำปฏิกิริยาจะยังคงยืดออกต่อไปในรอบต่อๆ ไป ทำให้เกิดสายเพปไทด์ที่ขาดกรดอะมิโนหนึ่งตัว - ที่รู้จักกันในชื่อลำดับการลบออก สำหรับเปปไทด์ของกรด 39-อะมิโน- แม้แต่ประสิทธิภาพการคัปปลิ้งโดยเฉลี่ย 99% ต่อขั้นตอนก็ส่งผลให้สายโซ่เพียง ~68% เท่านั้นที่มีลำดับความยาวเต็มที่ถูกต้อง สิ่งเจือปนที่ถูกลบออกมีโครงสร้างคล้ายคลึงกับเปปไทด์เป้าหมายอย่างมาก ทำให้ยากต่อการกำจัดในการทำให้บริสุทธิ์ขั้นปลายน้ำ

ข้อต่อที่ไม่สมบูรณ์

การขัดขวางสเตอริก การไม่ชอบน้ำของกรดอะมิโน และการรวมตัวของเมทริกซ์เรซิน ล้วนลดประสิทธิภาพการเชื่อมต่อที่ตำแหน่งลำดับเฉพาะ สำหรับ tirzepatide ส่วนที่ไม่เข้ากับน้ำที่อยู่ติดกับบริเวณที่เป็นไขมันมีแนวโน้มที่จะเกิดการมีเพศสัมพันธ์ที่ไม่สมบูรณ์เป็นพิเศษ ทำให้เกิดสิ่งเจือปนของเปปไทด์ที่ถูกตัดทอนซึ่งจะลดความบริสุทธิ์ของน้ำมันดิบโดยรวม

ผลการรวมกลุ่ม

เมื่อสายเปปไทด์ขยายออกไป ปฏิกิริยาที่ไม่ชอบน้ำระหว่างสาย-จะทำให้เปปไทด์ที่กำลังเติบโตพับตัวและรวมตัวกันบนพื้นผิวเรซิน สิ่งนี้จะฝังหมู่เอมีนที่ปลาย-ไว้ภายในกระจุกโมเลกุลที่มีขนาดกะทัดรัด ทำให้พวกมันไม่สามารถเข้าถึงรีเอเจนต์ที่เชื่อมต่อได้ การรวมตัวของเปปไทด์ใน SPPS เป็นสาเหตุที่ใหญ่ที่สุดเพียงสาเหตุเดียวที่ทำให้ผลผลิตลดลงสำหรับเปปไทด์ขนาดยาว เช่น ไทร์เซปาไทด์ และเป็นเหตุผลหลักที่ผู้ผลิตหลายรายไม่สามารถบรรลุผลลัพธ์ที่มีความบริสุทธิ์สูง-สม่ำเสมอในวงกว้างได้

ความท้าทายด้านผลตอบแทนที่อธิบายไว้ข้างต้นไม่ได้แยกจากผู้ผลิตรายเดียว - ซึ่งเป็นตัวแทนของปัญหาคอขวดเชิงโครงสร้างระดับโลกสำหรับอุตสาหกรรม API เปปไทด์ทั้งหมดอ้างอิงจากรายงานอุตสาหกรรมการผลิตเปปไทด์ทั่วโลกปี 2026 และข้อมูลการตรวจสอบซัพพลายเออร์ของ HDM BIO ในโรงงานทั่วโลก 30+ แห่งสำหรับเปปไทด์ระดับกรดยาว-อะมิโน- 39 ชนิดที่แสดงโดยไทร์เซปาไทด์ เกณฑ์มาตรฐานประสิทธิภาพทั่วทั้งอุตสาหกรรมยังคงต่ำอย่างต่อเนื่อง ทำให้เกิดข้อจำกัดด้านอุปทานที่เห็นได้ทั่วตลาดเปปไทด์ GLP-1 ในปี 2026

ข้อมูลเกณฑ์มาตรฐานอุตสาหกรรมหลัก

ความบริสุทธิ์ของน้ำมันดิบโดยเฉลี่ย: ความบริสุทธิ์ของเปปไทด์ดิบโดยเฉลี่ยของอุตสาหกรรมทั่วโลกสำหรับเปปไทด์ยาว 39AA ต่ำกว่า 65% โดยมีผู้ผลิตขนาดเล็กและขนาดกลาง-จำนวนมากลดลงต่ำกว่า 55%

ผลผลิตสำเร็จรูปโดยรวม: ตั้งแต่การบรรจุเรซินไปจนถึงผงไลโอฟิไลซ์บริสุทธิ์ขั้นสุดท้าย ผลผลิตรวมโดยเฉลี่ยของอุตสาหกรรมสำหรับเปปไทด์คลาส tirzepatide- น้อยกว่า 15%

โครงสร้างต้นทุน: สำหรับ-เปปไทด์สายโซ่ยาวที่มีความยาวนี้ ต้นทุนเปปไทด์การทำให้บริสุทธิ์ด้วย HPLC RP- คิดเป็นสัดส่วนมากกว่า 60% ของต้นทุนการผลิตทั้งหมด - ซึ่งเกินกว่าต้นทุนของขั้นตอนการสังเคราะห์เอง

ความจุที่ผ่านการรับรอง: ทั่วโลก โรงงานระดับ GMP น้อยกว่า 20 แห่ง-ใช้งาน SPPS + สาย HPLC แบบเตรียมการที่มีความสามารถในการผลิต 30+ เปปไทด์ยาว AA ที่เสถียร มีเพียงส่วนย่อยเล็กๆ เท่านั้นที่ตรวจสอบกระบวนการผลิตของ tirzepatide ได้

ความสม่ำเสมอของแบทช์: การรวมตัวที่ไม่สามารถควบคุมได้และประสิทธิภาพการเชื่อมต่อแบบแปรผันทำให้เกิดความผันผวนของความบริสุทธิ์แบบแบทช์-ถึง-โดยทั่วไปที่ ±3% ทั่วทั้งอุตสาหกรรม โดยมีลำดับความเสี่ยงสูง-ที่แสดงให้เห็นถึงความแปรปรวนที่มากยิ่งขึ้น

เกณฑ์มาตรฐานเหล่านี้อธิบายว่าทำไมอุปทาน tirzepatide API ไม่สามารถปรับขนาดได้อย่างรวดเร็ว แม้ว่าความต้องการของตลาดจะเพิ่มขึ้นก็ตาม ผู้ผลิตส่วนใหญ่ไม่สามารถเอาชนะความท้าทายทางเคมีขั้นพื้นฐานของ-เปปไทด์ยาว SPPS ในเชิงพาณิชย์ได้

สำหรับกรอบการทำงานที่มีโครงสร้างเพื่อระบุผู้ผลิตที่มีความสามารถในการผลิตเพปไทด์-แบบยาวที่ผ่านการตรวจสอบแล้ว โปรดดูคำแนะนำในการเลือกซัพพลายเออร์ tirzepatide API ที่เชื่อถือได้

ช่องว่างระหว่างการผลิตเปปไทด์มาตรฐานและการผลิตไทร์เซปาไทด์ และการเพิ่มประสิทธิภาพของเกณฑ์วิธีทางอุตสาหกรรมที่ได้รับการปรับปรุง สรุปไว้ในตารางด้านล่าง:

ผู้ผลิตเปปไทด์ชั้นนำได้พัฒนาการปรับปรุงประสิทธิภาพกระบวนการแบบกำหนดเป้าหมายเพื่อรับมือกับปัญหาคอขวดของผลผลิตเปปไทด์{0}}ที่กว้างและยาว-ของอุตสาหกรรม ซึ่งได้รับการปรับเทียบโดยเฉพาะกับลำดับกรดอะมิโนของไทร์เซปาไทด์

ขยายเวลาการเชื่อมต่อสำหรับเซ็กเมนต์ที่ยาก

สำหรับตำแหน่งที่ไม่ชอบน้ำและถูกขัดขวางแบบสเตอริไลด์ในลำดับไทร์เซพาไทด์ การขยายระยะเวลาการควบคู่เกินกว่าการกำหนดเวลามาตรฐานทำให้รีเอเจนต์แพร่กระจายไปในโดเมนเรซินที่รวมตัวกันบางส่วน ปรับปรุงความสมบูรณ์ของปฏิกิริยา นี่เป็นมาตรการที่เรียบง่ายแต่มีประสิทธิภาพสูงในการลดการก่อตัวของสิ่งเจือปนในการลบ

โปรโตคอลการเชื่อมต่อคู่

ที่ตำแหน่งที่มีความเสี่ยงสูง-ที่ระบุโดยการวิเคราะห์ลำดับและการตรวจสอบความถูกต้องของข้อมูลการผลิต กรดอะมิโนกัมมันต์ใหม่รอบที่สองถูกนำมาใช้หลังจากปฏิกิริยาคัปปลิงครั้งแรก การมีเพศสัมพันธ์แบบคู่สามารถเพิ่ม-การแปลงต่อขั้นตอนจาก ~98% เป็นมากกว่า 99.5% ซึ่งให้การปรับปรุงสะสมอย่างมากในผลผลิตเปปไทด์ความยาวเต็ม-ในขั้นตอนการยืดตัว 38 ขั้น

การเลือกกรดอะมิโนที่ได้รับการป้องกันอย่างเหมาะสม

การใช้กรดอะมิโน Fmoc ที่ได้รับการดัดแปลงเป็นพิเศษกับกลุ่มการละลายของสายโซ่-โพรลีนหรือด้านข้าง{1}}เทียมจะขัดขวางปฏิกิริยาโต้ตอบที่ไม่ชอบน้ำของสายโซ่ระหว่าง- ทำให้สายเปปไทด์ที่กำลังเติบโตอยู่ในโครงสร้างที่ขยายออกไปและสามารถเข้าถึงตัวรีเอเจนต์ได้ สำหรับไทร์เซพาไทด์ การแทนที่แบบกำหนดเป้าหมายของเรซิดิวที่ไม่ชอบน้ำหลักด้วยกรดอะมิโนที่ได้รับการปกป้องอย่างเหมาะสมจะช่วยลดการสูญเสียผลผลิตที่เกี่ยวข้องกับการรวมกลุ่ม-ได้อย่างมีนัยสำคัญ

ที่ HDM BIO เราได้ปรับปรุงโปรโตคอล SPPS เฉพาะของ tirzepatide- โดยผสมผสานทั้งสามกลยุทธ์เข้าด้วยกัน โดยเพิ่มความบริสุทธิ์ของเปปไทด์ดิบเป็น 70–75% - ซึ่งสูงกว่าค่าเฉลี่ยอุตสาหกรรมที่<65%. This reduces downstream purification burden by approximately 20%, shortens production cycles, and supports stable supply of ≥98% purity tirzepatide API for both small-batch R&D and large-scale industrial orders. Our process also delivers batch-to-batch purity variation of ≤1%, far exceeding industry consistency standards.

คู่มือนี้จะแจกแจงรายละเอียดกลไกการสังเคราะห์เปปไทด์ SPPS เต็มรูปแบบสำหรับ tirzepatide ซึ่งครอบคลุมหัวข้อหลักตั้งแต่หลักการเฟสของแข็งของเคมี Fmoc และเคมีการยืดตัวของสายโซ่เปปไทด์ ไปจนถึงความท้าทายในการผลิตเปปไทด์แบบยาว กระบวนการทำให้บริสุทธิ์เปปไทด์ดิบ และ-กระบวนการสังเคราะห์เปปไทด์ระดับอุตสาหกรรม 1 ระดับ- ขึ้นไป นอกจากนี้ ยังให้รายละเอียดพื้นฐานของเคมีเรซินเฟสของแข็ง กลไกการลดการป้องกัน Fmoc สาเหตุที่แท้จริงของการรวมตัวของเปปไทด์ใน SPPS และเปปไทด์การทำให้บริสุทธิ์ RP-HPLCsขั้นตอนการทำงานที่จำเป็นสำหรับการผลิต API ที่มีความบริสุทธิ์สูง-

ถาม: สามารถผลิต tirzepatide โดยการสังเคราะห์เปปไทด์เฟสของเหลว-ได้หรือไม่

ตอบ: ไม่ สำหรับเปปไทด์กรดอะมิโน- 39- ที่มีสายโซ่ด้านข้างที่เป็นลิพิด การสังเคราะห์เฟสของเหลวจะต้องใช้ขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ขั้นกลางหลายสิบขั้นตอน ส่งผลให้ผลผลิตโดยรวมต่ำมากและไม่มีความเป็นไปได้ในเชิงพาณิชย์ API tirzepatide อุตสาหกรรมทั้งหมดผลิตผ่าน Fmoc SPPS

ถาม: การสังเคราะห์ tirzepatide SPPS หนึ่งชุดใช้เวลานานเท่าใด

ตอบ: โดยทั่วไป-วงจรการประกอบเฟสโซลิดสำหรับ-ชุด tirzepatide ความยาวเต็มจะใช้เวลา 7–10 วัน ขึ้นอยู่กับขนาดชุดและจำนวนตำแหน่งคู่-ที่ปรับให้เหมาะสม สิ่งนี้ไม่รวมถึงขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ด้วย HPLC และการทำไลโอฟิไลเซชันที่ตามมา

ถาม: ความบริสุทธิ์อย่างหยาบโดยทั่วไปของ tirzepatide หลังจาก SPPS เป็นเท่าใด

ตอบ: ด้วยโปรโตคอล SPPS มาตรฐาน ความบริสุทธิ์ของ tirzepatide แบบดิบจะอยู่ระหว่าง 55–65% ซึ่งสอดคล้องกับค่าเฉลี่ยอุตสาหกรรมทั่วโลกสำหรับเปปไทด์ 39AA ด้วยโปรโตคอลทางอุตสาหกรรมที่ได้รับการปรับปรุง รวมถึงการออกแบบกรดอะมิโนที่ต้านทานการรวมกลุ่มและการรวมตัว- ความบริสุทธิ์ของน้ำมันดิบอาจสูงถึง 70–75% ก่อนการทำให้บริสุทธิ์ขั้นปลายน้ำ

ถาม: รีเอเจนต์คัปปลิ้งใดบ้างที่ใช้สำหรับ tirzepatide SPPS

ตอบ: โดยทั่วไปแล้วการผลิต tirzepatide ทางอุตสาหกรรมจะใช้ HBTU/HOBt เป็นระบบรีเอเจนต์เชื่อมต่อมาตรฐานสำหรับสารตกค้างส่วนใหญ่ สำหรับส่วนที่ไม่ชอบน้ำที่ยากลำบากและมีความเสี่ยงในการรวมตัวสูง HATU จะถูกใช้เพื่อให้ได้ปฏิกิริยาที่สูงขึ้นและประสิทธิภาพการเชื่อมต่อที่ดีขึ้น

ถาม: tirzepatide ใช้การสังเคราะห์ Boc หรือ Fmoc หรือไม่

ตอบ: การผลิต tirzepatide API เชิงพาณิชย์สมัยใหม่ทั้งหมดใช้ SPPS ที่ใช้ Fmoc{0}} กลยุทธ์ Boc ต้องการสภาวะที่เป็นกรดที่รุนแรงขึ้นและขั้นตอนการตัดแยก HF ซ้ำๆ ซึ่งเข้ากันไม่ได้กับการปรับเปลี่ยนสายโซ่ด้านกรดไขมันที่ละเอียดอ่อนของโมเลกุล- และจะทำให้เกิดปฏิกิริยาข้างเคียงที่มากเกินไป

ถาม: จะลดการรวมตัวกันของเปปไทด์ในระหว่างการสังเคราะห์ tirzepatide ได้อย่างไร

ตอบ: กลยุทธ์ที่ได้รับการตรวจสอบโดยทั่วไป ได้แก่ ความหนาแน่นในการโหลดเรซินที่เหมาะสมที่สุดเพื่อลดปฏิสัมพันธ์ระหว่างสาย-ลูกโซ่ การแทนที่กรดอะมิโนโพรลีน-เทียมที่บริเวณที่ไม่ชอบน้ำ ขยายเวลาการต่อพ่วงสำหรับส่วนที่ยาก โปรโตคอลการต่อคู่สำหรับ-ตำแหน่งที่มีความเสี่ยงสูง และการควบคุมอุณหภูมิในระหว่างรอบการยืดตัว